产品详情
对于日常有大量基因表达定量、高通量基因分型、病原体筛查或高分辨率熔解曲线（HRM）分析需求，但又面临新机采购预算不足或排期等待过长的实验室来说，一台经过专业检测、深度清洁、核心耗材更替与性能校准确认的二手罗氏（Roche）LightCycler 480 II 实时荧光定量PCR仪（384孔版），是非常经典且高性价比的务实之选。LightCycler 480 II 是罗氏诊断推出的旗舰级台式实时荧光定量PCR（qPCR）平台，它以独特的银质加热模块结合 Therma-Base 热循环技术、全固定光路的冷CCD同步成像光学系统，以及灵活可互换的96/384孔加热模块设计著称。尽管该机型已逐步被新一代数字PCR或更快的qPCR平台迭代，但凭借其原本极其稳定的温控均一性、宽广的动力学检测范围、出色的HRM功能以及成熟的软件算法，二手机在专业第三方仪器服务商的标准化整备（内部除尘、风扇维护、热模块平整度检查、光源亮度测试、光路校准与标准品验证）后，依然能为各类分子生物学、医学诊断、药物研发及检验检疫研究提供原厂级稳定、灵敏且可重复的数据，是高校课题组、第三方检测中心、制药/生物公司研发部门、疾控中心以及教学实验室以远低于新机的价格获取高通量qPCR检测能力的理想方案。
核心温控与光学检测技术
LightCycler 480 II 的核心竞争力首先体现在其精准快速的温控系统与高灵敏的光学检测系统。温控方面，它采用高导热率的银质加热模块，并结合罗氏的 Therma-Base 热循环技术，在加热/制冷元件与模块基架间引入高效热平衡设计，使得模块最大升温速度可达 6.8℃/秒，样品平均升温速度达 4.8℃/秒，降温速度 2.5℃/秒；更关键的是，其孔间温度均一性高达 ±0.1℃（37–99℃），这从根本上保障了不同孔位间PCR扩增效率的一致性，也是其后期能做高精度HRM分析的物理基础。光学方面，该机采用高强度全光谱白色光源（早期批次为氙灯，后期批次多为长寿命LED）与低温制冷型CCD（Cold CCD，工作约10℃）探测器；光路设计为全固定式，通过棱镜与滤光片组合实现对整块 384 孔板的同步激发与同步采集，不仅避免了逐孔扫描或逐行扫描带来的时间差，还彻底消除了常见的“边缘效应”，无需添加ROX等被动参考染料即可获得的孔间重现性（Ct值 CV < 0.15%）。仪器标配5个激发通道和6个发射通道（或可配置为6检测通道），支持自由组合，可同时检测 FAM/SYBR、HEX/VIC、Cy5、ROX 等多重荧光，适合多重qPCR实验。
多样化分析模式与软件生态
该仪器配合罗氏 LightCycler 480 软件（部分版本符合 FDA 21 CFR Part 11 合规要求），支持绝对的定量（标准曲线法）、相对定量（ΔΔCt 及效率校正 E-b）、熔解曲线分析、高分辨率熔解曲线（HRM）、终点法及熔解曲线法基因分型（SNP/突变扫描）、产物鉴定等。其中，其 HRM 功能尤为突出：依靠 0.01℃ 的熔解曲线温度分辨率和每摄氏度100个数据点的采集频率，无需特异性水解探针，仅用SYBR Green I等廉价饱和染料即可进行SNP分型、甲基化分析、微生物鉴定及未知突变扫描，大大降低了检测成本。软件界面逻辑清晰，可实时显示扩增曲线、熔解峰及基因分型聚类图，并支持数据导出进行后续统计。
灵活的通量与自动化扩展
LightCycler 480 II 设计的一大亮点是其可互换的加热模块：用户可根据实验通量需求，自行将 384 孔模块（反应体积 5–20 µL）更换为 96 孔模块（反应体积 10–100 µL），或反之，且无需工程师到场校准，极大提升了单机的使用灵活性。此外，该机可对接自动化液体处理工作站与堆板机（如罗氏或第三方LIMS系统），通过条形码识别板位，实现远程操作与全自动化运行，适合构建高通量核酸检测流水线（如临床批量样本筛查）。
应用场景与采购价值
二手 LightCycler 480 II（384孔配置）广泛应用于分子生物学（mRNA/miRNA表达定量、基因拷贝数分析）、医学与临床研究（病毒载量检测如HIV/HCV/流感/新冠、肿瘤突变基因EGFR/KRAS检测、遗传病SNP）、药物筛选与毒理学（药物诱导基因表达变化、siRNA敲减验证）、微生物学（病原菌鉴定、抗性基因筛查）、以及食品环境检测（转基因成分、食源性致病菌）等。对于教学单位，它是让学生掌握qPCR原理、引物探针设计、熔解曲线与HRM分析的综合教学平台；对于预算有限的课题组或中小型生物公司，它以约新机 30%–50% 的价格（视年限与配置，二手市场常见数十万级），提供了罗氏经典的高通量qPCR性能。采购时应重点确认：二手机具体配置（是仅384孔模块，还是带96孔模块；软件是否含合规版）；光源类型与衰减情况（LED优于老式氙灯，老灯可能光强衰减影响HRM与低拷贝检测）；热模块银质表面平整度与无腐蚀（影响温度均一性）；风扇与散热系统状态；以及是否提供关键性能验证报告（如用标准质粒做标准曲线评估效率与R²、用已知SNP做HRM分型、评估384孔板Ct值CV等）。由于罗氏官方常不为非原渠道二手机提供保修，建议确认第三方服务商能否提供核心板卡（主板、电源、温控驱动）与热模块的维修支持。
LightCycler 480 II（384孔版）主要产品参数表：
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参数项目 |
规格描述 |
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品牌与产地 |
Roche（罗氏），瑞士 |
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检测模式 |
实时荧光定量PCR（qPCR） |
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反应通量 |
384 孔板（5–20 µL/孔），可互换 96 孔模块（10–100 µL/孔） |
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温控技术 |
银质加热模块 + Therma-Base 热循环技术（Peltier） |
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温控范围 |
37℃ – 99℃ |
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升温速率（样品/模块） |
最大 4.8℃/秒（样品），6.8℃/秒（模块） |
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降温速率（最大） |
2.5℃/秒 |
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温度准确性 |
±0.1℃（37–99℃） |
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温度均一性 |
±0.1℃（37–99℃） |
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熔解曲线分辨率 |
0.01℃ |
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熔解曲线数据采集 |
每摄氏度 100 个数据点 |
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激发光源 |
高强度全光谱白色光源（氙灯或白色LED，依批次） |
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检测系统 |
制冷型CCD（Cold CCD，工作约 10℃） |
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检测通道 |
5个激发通道 + 6个发射通道（支持多通道自由组合，常见 FAM、HEX、Cy5、ROX 等） |
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动力学范围 |
1 – 10^10 拷贝（约 10 个数量级） |
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检测灵敏度 |
可检测单拷贝基因 |
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重复性（Ct CV） |
< 0.15% |
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反应时间（典型） |
40 个循环（384 孔板）约 40 分钟 |
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适用化学/探针 |
SYBR Green I、TaqMan（水解探针）、Hybridization Probe（FRET）、SimpleProbe、Molecular Beacon、Saturation Dyes 等 |
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分析功能 |
绝对定量、相对定量（ΔΔCt/E-b）、熔解曲线、HRM、基因分型（终点法/熔解曲线法）、产物鉴定等 |
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软件 |
LightCycler 480 软件（可选 21 CFR Part 11 合规版） |
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数据导出 |
支持 Excel、TXT、XML 等 |
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自动化兼容 |
可接 LIMS、条形码扫描、自动进样机械臂、堆板机 |
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尺寸 (W×D×H) |
约 57.4 × 58.8 × 49.7 cm |
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重量 |
约 55.6 kg |
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功率 |
200–240 VAC，50/60 Hz，1500 VA |
注意事项：二手机常因使用年限（如5–10年）、具体配置（单模块/双模块、软件授权）、过往维护状况差异较大；老式氙灯光源可能存在光强衰减，影响低拷贝检测与HRM，需确认亮度或是否已换LED；银质热模块表面若有腐蚀、氧化或变形，会严重影响温度均一性，建议要求提供384孔空板或梯度温度均一性测试记录；风扇积灰或轴承磨损会导致过热报警，需检查散热；软件老版本可能需适配旧版 Windows（如XP/7），或寻求特定驱动支持；罗氏原厂通常不为二手设备提供保修，核心板卡与热模块维修成本较高，建议确认是否有靠谱第三方维修渠道。
